Pura oleo de Saposhnikovia divaricata por kandelo- kaj sapfabrikado pogranda difuzilo esenca oleo nova por difuziloj de kanbruliloj

mallonga priskribo:

2.1. Preparado de SDE

La rizomoj de SD estis aĉetitaj kiel sekigitaj herboj de Hanherb Co. (Guri, Koreio). La plantmaterialojn konfirmis taksonomie D-ro Go-Ya Choi de la Korea Instituto de Orienta Medicino (KIOM). Proviza specimeno (numero 2014 SDE-6) estis deponita en la Korea Herbario de Normaj Herbaj Rimedoj. Sekigitaj rizomoj de SD (320 g) estis ekstraktitaj dufoje per 70% etanolo (kun 2-hora refluo) kaj la ekstrakto estis poste koncentrita sub reduktita premo. La dekoktaĵo estis filtrita, liofiligita kaj konservita je 4°C. La rendimento de sekigita ekstrakto el krudaj startmaterialoj estis 48,13% (p/p).

2.2. Kvanta Alt-Efikeca Likva Kromatografio (HPLC) Analizo

Kromatografia analizo estis farita per HPLC-sistemo (Waters Co., Milford, MA, Usono) kaj detektilo kun fotodiodoj. Por la HPLC-analizo de SDE, la ĉefaO-glukosilcimifugina normo estis aĉetita de la Korea Promocia Instituto por Tradicia Medicina Industrio (Gyeongsan, Koreio), kajsek-O-glukosilhamaŭdolo kaj 4′-O-β-D-glukosil-5-O-metilvisaminolo estis izolitaj en nia laboratorio kaj identigitaj per spektraj analizoj, ĉefe per NMR kaj MS.

SDE-specimenoj (0,1 mg) estis solvitaj en 70%-a etanolo (10 mL). Kromatografia apartigo estis farita per XSelect HSS T3 C18-kolumno (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, Usono). La movebla fazo konsistis el acetonitrilo (A) kaj 0.1% acetata acido en akvo (B) je flukvanto de 1.0 mL/min. Plurpaŝa gradienta programo estis uzata jene: 5% A (0 min), 5–20% A (0–10 min), 20% A (10–23 min), kaj 20–65% A (23–40 min). La detekta ondolongo estis skanita je 210–400 nm kaj registrita je 254 nm. La injekta volumeno estis 10.0μL. Normaj solvaĵoj por la determinado de tri kromonoj estis preparitaj je fina koncentriĝo de 7,781 mg/mL (principo-O-glukosilcimifugino), 31.125 mg/mL (4′-O-β-D-glukosil-5-O-metilvisaminolo), kaj 31,125 mg/ml (sek-O-glukosilhamaŭdolo) en metanolo kaj konservata je 4 °C.

2.3. Takso de Kontraŭinflama AgadoEn Vitro

2.3.1. Ĉelkulturo kaj Specimena Traktado

KRUDAJ 264.7 ĉeloj estis akiritaj de la Amerika Tipa Kulturkolekto (ATCC, Manassas, VA, Usono) kaj kreskigitaj en DMEM-medio enhavanta 1% antibiotikojn kaj 5.5% FBS. Ĉeloj estis inkubaciitaj en humidigita atmosfero de 5% CO2 je 37°C. Por stimuli la ĉelojn, la medio estis anstataŭigita per freŝa DMEM-medio, kaj lipopolisakarido (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, Usono) je 1μg/mL estis aldonita en la ĉeesto aŭ foresto de SDE (200 aŭ 400μg/mL) dum pliaj 24 horoj.

2.3.2. Determino de Nitrata Monoksido (NO), Prostaglandino E2 (PGE2), Tumora Nekroza Faktoro-α(TNF-α), kaj Interleukin-6 (IL-6) Produktado

Ĉeloj estis traktitaj per SDE kaj stimulitaj per LPS dum 24 horoj. NO-produktado estis analizita per mezurado de nitrito uzante la Griess-reakciilon laŭ antaŭa studo [12]. Sekrecio de la inflamaj citokinoj PGE2, TNF-α, kaj IL-6 estis determinita uzante ELISA-kompleton (R&D-sistemoj) laŭ la instrukcioj de la fabrikanto. La efikoj de SDE sur NO kaj citokina produktado estis determinitaj je 540 nm aŭ 450 nm uzante Wallac EnVision.™mikroplatlegilo (PerkinElmer).

2.4. Takso de Kontraŭosteoartrita AktivecoEn Vivo

2.4.1. Bestoj

Viraj Sprague-Dawley-ratoj (7 semajnojn aĝaj) estis aĉetitaj de Samtako Inc. (Osan, Koreio) kaj loĝigitaj sub kontrolitaj kondiĉoj kun 12-hora lumo/mallumo-ciklo je°C kaj% humideco. Ratoj ricevis laboratorian dieton kaj akvonlaŭvoleĈiuj eksperimentaj proceduroj estis plenumitaj konforme al la gvidlinioj de la Naciaj Institutoj pri Sano (NIH) kaj aprobitaj de la Komitato pri Bestoprizorgo kaj Uzo de la Universitato Daejeon (Daejeon, Respubliko Koreio).

2.4.2. Indukto de OA kun MIA en Ratoj

La bestoj estis hazarde asignitaj al kuracgrupoj antaŭ la komenco de la studo ((por grupo). MIA-solvaĵo (3 mg/50μL da 0.9% salakvo) estis rekte injektita en la intra-artikan spacon de la dekstra genuo sub anestezo induktita per miksaĵo de ketamino kaj ksilazino. Ratoj estis hazarde dividitaj en kvar grupojn: (1) la salakva grupo sen MIA-injekto, (2) la MIA-grupo kun MIA-injekto, (3) la SDE-traktita grupo (200 mg/kg) kun MIA-injekto, kaj (4) la indometacin- (IM-)-traktita grupo (2 mg/kg) kun MIA-injekto. Ratoj ricevis buŝe SDE kaj IM 1 semajnon antaŭ MIA-injekto dum 4 semajnoj. La dozo de SDE kaj IM uzita en ĉi tiu studo baziĝis sur tiuj uzitaj en antaŭaj studoj [10,13,14].

2.4.3. Mezuroj de Pezo-Portanta Distribuo ĉe Malantaŭpiedoj

Post OA-indukto, la originala ekvilibro en la pez-portanta kapablo de malantaŭaj piedoj estis interrompita. Nekapacitanctesilo (Linton Instrumentation, Norfolk, UK) estis uzata por taksi ŝanĝojn en la pez-portanta toleremo. Ratoj estis zorge metitaj en la mezurĉambron. La pez-portanta forto penita de la malantaŭa kruro estis averaĝita dum 3-sekonda periodo. La pez-distribua proporcio estis kalkulita per la sekva ekvacio: [pezo sur la dekstra malantaŭa kruro/(pezo sur la dekstra malantaŭa kruro + pezo sur la maldekstra malantaŭa kruro)] × 100 [15].

2.4.4. Mezuradoj de Serumaj Citokinaj Niveloj

La sangospecimenoj estis centrifugitaj je 1500 g dum 10 minutoj je 4 °C; poste la serumo estis kolektita kaj konservita je −70 °C ĝis uzo. La niveloj de IL-1β, IL-6, TNF-α, kaj PGE2 en la serumo estis mezuritaj uzante ELISA-ilarojn de R&D Systems (Minneapolis, MN, Usono) laŭ la instrukcioj de la fabrikanto.

2.4.5. Realtempa Kvanta RT-PCR-Analizo

Totala RNA estis ekstraktita el genua artika histo uzante la TRI-reakciilon® (Sigma-Aldrich, Sankta Luiso, Misurio, Usono), inverse transskribita en cDNA kaj PCR-ampligita uzante TM One Step RT PCR-ilaron kun SYBR-verda (Applied Biosystems, Grand Island, Novjorkio, Usono). Realtempa kvanta PCR estis plenumita uzante la Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR-sistemon (Applied Biosystems, Grand Island, Novjorkio, Usono). La prajmeraj sekvencoj kaj la sondsekvenco estas montritaj en Tabelo.1Alikvotoj de provaĵaj cDNA-oj kaj egala kvanto de GAPDH-cDNA estis amplifikitaj per la TaqMan® Universal PCR-majstra miksaĵo enhavanta DNA-polimerazon laŭ la instrukcioj de la fabrikanto (Applied Biosystems, Foster, CA, Usono). La PCR-kondiĉoj estis 2 minutoj je 50°C, 10 minutoj je 94°C, 15 sekundoj je 95°C, kaj 1 minuto je 60°C dum 40 cikloj. La koncentriĝo de la cela geno estis determinita uzante la komparan Ct-metodon (sojla cikla nombro ĉe kruciĝo inter amplifika grafikaĵo kaj sojlo), laŭ la instrukcioj de la fabrikanto.

FOB-Prezo:0,5 - 9 999 usonaj dolaroj / peco

Minimuma Mendokvanto:100 Pecoj/Pecoj

Proviza Kapablo:10000 pecoj/pecoj po monato

Sendu retpoŝton al ni

Produkta Detalo

Produktaj Etikedoj

Osteoartrito (OA) estas la plej ofta muskoloskeleta malsano kaj la plej ofta degenera artika malsano ĉe maljunuloj [1]. OA estas kondiĉo parte kaŭzita de vundo, perdo de kartilaga strukturo kaj funkcio, kaj misreguligo de proinflamatoriaj kaj kontraŭinflamatoriaj vojoj [2,3]. Ĝi ĉefe influas la artikan kartilagon kaj subkondran oston de sinoviaj artikoj kaj rezultas en artika fiasko, kaŭzante doloron dum pez-portado, inkluzive de piedirado kaj starado [4].

Ne ekzistas kuraco por OA, ĉar estas tre malfacile restarigi la kartilagon post kiam ĝi estas detruita.5]. La celoj de la kuracado estas mildigi doloron, konservi aŭ plibonigi artikan moveblecon, pliigi la forton de la artikoj, kaj minimumigi la invalidigajn efikojn de la malsano. Farmakologiaj kuracadoj de OA celas redukti doloron por plibonigi la artikan funkcion kaj vivokvaliton de la paciento. Kvankam kartilaga detruo estas la ĉefa evento en OA, la degenero de kolageno estas la fundamenta okazaĵo, kiu determinas la nereverteblan progreson de OA lige kun inflamo [6,7]. Oni atendas, ke traktadoj kun kontraŭinflama kaj kondroprotekta agado mildigos doloron kaj konservos la matrican integrecon ĉe pacientoj kun OA.

Tial, malpliigo de inflamo verŝajne estos utila en la traktado de OA. Lastatempaj studoj sugestas protektajn rolojn por herbaj rimedoj rilate al la progreso de OA, rilate al mildigo de kondrocita inflamo kaj plia kartilaga detruo, per ilia kapablo interagi kun artik-rilataj histoj, rezultante en la mildigo de artika doloro.8].

La radiko deSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) estas vaste uzata en tradicia medicino por la traktado de kapdoloro, doloro, inflamo kaj artrito en Koreio kaj Ĉinio [9,10]. La diversaj farmakologiaj efikoj deSaposhnikovia divaricata(SD) ankaŭ inkluzivas kontraŭinflamatoriajn, sendolorigajn, kontraŭfebrajn kaj kontraŭartritajn ecojn [9,11]. Lastatempa studo montris, ke SD-kromona ekstrakto posedas eblajn kontraŭreŭmatoidajn artritajn efikojn en musmodelo de kolagen-induktita artrito [10]; tamen, malmultaj studoj estis faritaj por subteni la kontraŭinflaman kaj kontraŭartritan agadon deSaposhnikovia divaricataekstrakto (SDE).

Tial, la nuna studo esploris la kontraŭinflamatoriajn kaj kontraŭosteoartritajn aktivecojn de 70%-etanola ekstrakto de SD. Unue, la kontraŭinflamatoria efiko de SDE estis taksita.en vitroen LPS-induktitaj RAW 264.7 ĉeloj. Poste, la kontraŭosteoartrita efiko de SDE estis mezurita per taksado de pez-portanta distribuo, degenero de artika kartilago, kaj inflamaj respondoj en rata modelo de mononatria jodoacetato- (MIA-) induktita OA.