Osteoartrito (OA) estas unu el la longdaŭraj kronikaj degeneraj ostaj artikaj malsanoj, kiuj trafas la maljunan loĝantaron super 65 jaroj.
1]. Ĝenerale, pacientoj kun OA estas diagnozitaj kun difektita kartilago, inflama sinovio, kaj eroziitaj kondrocitoj, kiuj kaŭzas doloron kaj fizikan aflikton [
2]. Artrita doloro estas ĉefe kaŭzita de la degenero de kartilago en artikoj per inflamo, kaj kiam la kartilago estas grave difektita, ostoj povas kolizii unu kun la alia kaŭzante neelteneblan doloron kaj fizikajn malfacilaĵojn [
3]. La implikiĝo de inflamaj mediaciiloj kun simptomoj kiel doloro, ŝvelado kaj rigideco de la artiko estas bone dokumentita. Ĉe pacientoj kun OA, inflamaj citokinoj, kiuj kaŭzas la erozion de kartilago kaj subkondra osto, troviĝas en la sinovia fluido [
4]. Du gravaj plendoj, kiujn pacientoj kun OA ĝenerale havas, estas doloro kaj sinovia inflamo. Tial la ĉefaj celoj de la nunaj OA-terapioj estas malaltigi doloron kaj inflamon. [
5]. Kvankam la haveblaj OA-traktadoj, inkluzive de nesteroidaj kaj steroidaj drogoj, pruvis efikecon en mildigo de doloro kaj inflamo, la longdaŭraj uzoj de ĉi tiuj drogoj havas severajn sanajn sekvojn kiel ekzemple kardiovaskulaj, gastro-intestaj kaj renaj misfunkcioj [
6]. Tial, pli efika medikamento kun malpli da kromefikoj devas esti evoluigita por la traktado de osteoartrito.
Naturaj sanproduktoj fariĝas pli kaj pli popularaj pro tio, ke ili estas sekuraj kaj facile haveblaj.
7]. Tradiciaj koreaj medikamentoj pruvis efikecon kontraŭ pluraj inflamaj malsanoj, inkluzive de artrito [
8]. Aucklandia lappa DC. estas konata pro siaj kuracaj ecoj, kiel ekzemple plibonigo de la cirkulado de ĉi por mildigo de doloro kaj trankviligo de la stomako, kaj estis tradicie uzata kiel natura kontraŭdolorilo [
9]. Antaŭaj raportoj sugestas, ke A. lappa posedas kontraŭinflaman [
10,
11], analgeziaĵo [
12], kontraŭkancera [
13], kaj gastroprotektiva [
14] efikoj. La diversaj biologiaj aktivecoj de A. lappa estas kaŭzitaj de ĝiaj ĉefaj aktivaj komponaĵoj: kostunolido, dehidrokostuslaktono, dihidrokostunolido, kostuslaktono, α-kostolo, saussurea laktono kaj kostuslaktono [
15]. Pli fruaj studoj asertas, ke kostunolido montris kontraŭinflamatoriajn ecojn en lipopolisakarido (LPS), kiu induktis la makrofagojn per la reguligo de NF-kB kaj varmoŝoka proteina vojo [
16,
17]. Tamen, neniu studo esploris la eblajn aktivecojn de A. lappa por OA-traktado. La nuna esplorado esploris la terapiajn efikojn de A. lappa kontraŭ OA uzante (mononatria-jodacetato) MIA kaj acetacido-induktitajn ronĝulojn.
Mononatria jodoacetato (MIA) estas fame uzata por produkti multon el la doloraj kondutoj kaj la patofiziologiajn trajtojn de OA en bestoj [
18,
19,
20]. Kiam injektita en genuajn artikojn, MIA malordigas la kondrocitan metabolon kaj induktas inflamon kaj inflamajn simptomojn, kiel ekzemple erozio de kartilago kaj subkondra osto, la ĉefaj simptomoj de OA [
18]. Tordiĝa respondo induktita per acetata acido estas vaste rigardata kiel simulado de periferia doloro en bestoj, kie la inflama doloro povas esti kvante mezurita [
19]. La musa makrofaga ĉellinio, RAW264.7, estas populare uzata por studi la ĉelajn respondojn al inflamo. Post aktivigo per LPS, RAW264-makrofagoj aktivigas inflamajn vojojn kaj sekrecias plurajn inflamajn perantojn, kiel ekzemple TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS kaj IL-6 [
20]. Ĉi tiu studo taksis la kontraŭnociceptajn kaj kontraŭinflamatoriajn efikojn de A. lappa kontraŭ OA en MIA-besta modelo, acetacido-induktita besta modelo, kaj LPS-aktivigitaj RAW264.7-ĉeloj.
2. Materialoj kaj Metodoj
2.1. Plantmaterialo
La sekigita radiko de *A. lappa* DC. uzita en la eksperimento estis akirita de Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seulo, Koreio). Ĝin identigis Profesoro Donghun Lee, Departemento de Herba Farmakologio, Kolonio de Korea Medicino, Universitato Gachon, kaj la specimennumero de la kupono estis deponita kiel 18060301.
2.2. HPLC-Analizo de Ekstrakto de A. lappa
A. lappa estis ekstraktita per refluxa aparato (distilita akvo, 3 horoj je 100 °C). La ekstraktita solvaĵo estis filtrita kaj kondensita per malaltprema vaporigilo. La ekstrakto de A. lappa havis rendimenton de 44,69% post liofilizado sub −80 °C. Kromatografia analizo de A. lappa estis farita per HPLC konektita per 1260 InfinityⅡ HPLC-sistemo (Agilent, Pal Alto, Kalifornio, Usono). Por kromata apartigo, EclipseXDB C18-kolumno (4,6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) estis uzita je 35 °C. Entute 100 mg da la specimeno estis diluitaj en 10 mL da 50% metanolo kaj sonigitaj dum 10 minutoj. Specimenoj estis filtritaj per injektila filtrilo (Waters Corp., Milford, MA, Usono) de 0,45 μm. La konsisto de la mobilfazo estis 0.1% fosforacido (A) kaj acetonitrilo (B) kaj la kolono estis eluvita jene: 0–60 min, 0%; 60–65 min, 100%; 65–67 min, 100%; 67–72 min, 0% solvilo B kun flukvanto de 1.0 mL/min. La elfluaĵo estis observita je 210 nm uzante injektan volumenon de 10 μL. La analizo estis farita trioble.
2.3. Bestoloĝado kaj Administrado
Viraj Sprague-Dawley (SD) ratoj aĝantaj 5 semajnojn kaj masklaj ICR-musoj aĝantaj 6 semajnojn estis aĉetitaj de Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Koreio). La bestoj estis tenataj en ĉambro kun konstanta temperaturo (22 ± 2 °C) kaj humideco (55 ± 10%) kaj lumo/mallumo-ciklo de 12/12 horoj. La bestoj estis alkutimiĝintaj al la kondiĉoj dum pli ol semajno antaŭ la komenco de la eksperimento. La bestoj havis laŭbezone provizon de furaĝo kaj akvo. La nunaj etikaj reguloj por besta prizorgo kaj manipulado ĉe la Universitato Gachon (GIACUC-R2019003) estis strikte sekvataj en ĉiuj bestaj eksperimentaj proceduroj. La studo estis desegnita kiel esplorist-blinda kaj paralela provo. Ni sekvis la eŭtanazio-metodon laŭ la gvidlinioj de la Komitato pri Besta Eksperimenta Etiko.
2.4. MIA-injekto kaj traktado
Ratoj estis hazarde apartigitaj en 4 grupojn, nome ŝajngrupon, kontrolon, indometacinon, kaj A. lappa. Estante anestezitaj per 2%-izofluorana O2-miksaĵo, la ratoj estis injektitaj per 50 μL da MIA (40 mg/m²; Sigma-Aldrich, Sankta Luiso, MO, Usono) intra-artike en la genuajn artikojn por konduki al eksperimenta OA. La traktadoj estis faritaj jene: kontrola kaj ŝajngrupoj estis konservitaj nur per la baza dieto AIN-93G. Nur la indometacina grupo ricevis indometacinon (3 mg/kg) enigitan en la AIN-93G-dieton, kaj la A. lappa 300 mg/kg grupo estis asignita al AIN-93G-dieto kompletigita per A. lappa (300 mg/kg). La traktadoj estis daŭrigitaj dum 24 tagoj ekde la tago de OA-indukto je rapideco de 15-17 g por 190-210 g korpopezo ĉiutage.
2.5. Mezurado de Pezoportanta
Post la indukto de OA, oni mezuris la pezportantan kapaciton de la malantaŭaj kruroj de la ratoj per la nekapacitancmezuriloTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, Kalifornio, Usono) laŭplane. La pezdistribuo sur la malantaŭaj kruroj estis kalkulita: pezportanta kapacito (%)
