Osteoartrito (OA) estas unu el la longdaŭraj kronikaj degeneraj ostaj artiko-malsanoj, kiuj tuŝas la aĝan loĝantaron pli ol 65-jaraĝan.
1]. Ĝenerale, OA-pacientoj estas diagnozitaj kun difektita kartilago, inflama sinovio, kaj eroziitaj kondrocitoj, kiuj ekigas doloron kaj fizikan aflikton.
2]. Artrita doloro estas ĉefe kaŭzita de la degenero de kartilago en artikoj per inflamo, kaj kiam la kartilago estas grave difektita, ostoj povas kolizii unu kun la alia kaŭzante neelteneblan doloron kaj fizikan aflikton.
3]. La implikiĝo de inflamaj mediaciistoj kun simptomoj kiel doloro, ŝvelaĵo kaj rigideco de la artiko estas bone dokumentita. En pacientoj kun OA, inflamaj citokinoj, kiuj kaŭzas la erozion de kartilago kaj subkondrala osto troviĝas en la sinovia likvaĵo.
4]. Du gravaj plendoj, kiujn OA-pacientoj ĝenerale havas, estas doloro kaj sinovia inflamo. Tial la ĉefaj celoj de la nunaj OA-terapioj estas malaltigi doloron kaj inflamon. [
5]. Kvankam la disponeblaj OA-traktadoj, inkluzive de ne-steroidaj kaj steroidaj drogoj, pruvis efikecon por mildigi doloron kaj inflamon, la longperspektivaj uzoj de ĉi tiuj drogoj havas severajn sanajn konsekvencojn kiel kardiovaskulajn, gastro-intestajn, kaj renaj misfunkcioj.
6]. Tiel, pli efika medikamento kun malpli da kromefikoj devas esti evoluigita por la traktado de osteoartrito.
Naturaj sanproduktoj estas ĉiam pli popularaj pro esti sekuraj kaj facile haveblaj [
7]. Tradiciaj koreaj medikamentoj pruvis efikecon kontraŭ pluraj inflamaj malsanoj, inkluzive de artrito.
8]. Aucklandia lappa DC. estas konata pro siaj kuracaj propraĵoj, kiel plibonigo de la cirkulado de qi por malpezigi doloron kaj trankviligi la stomakon, kaj estis uzata tradicie kiel natura analgeziko [
9]. Antaŭaj raportoj sugestas ke A. lappa posedas kontraŭinflamatorian [
10,
11], analgeziko [
12], kontraŭkancero [
13], kaj gastroprotekta [
14] efikoj. La diversaj biologiaj agadoj de A. lappa estas kaŭzitaj de ĝiaj plej gravaj aktivaj komponaĵoj: costunolido, dehidrokosto laktono, dihidrokostunolido, costuslaktono, α-costol, saussurea laktono kaj costuslaktono [1]
15]. Pli fruaj studoj asertas, ke costunolido montris kontraŭinflamatoriajn trajtojn en lipopolisakarido (LPS), kiu induktis la makrofagojn per la reguligo de NF-kB kaj varmoŝoka proteina vojo.
16,
17]. Tamen, neniu studo esploris la eblajn agadojn de A. lappa por OA-traktado. La nuna esplorado esploris la terapiajn efikojn de A. lappa kontraŭ OA uzante (monosodio-jodoacetato) MIA kaj acetacido-induktitaj ronĝulmodeloj.
Monosodio-jodoacetato (MIA) estas fame uzata por produkti multon el la dolorkondutoj kaj la patofiziologiaj trajtoj de OA en bestoj [1]
18,
19,
20]. Se injektita en genuajn artikojn, MIA perturbas la kondrocitan metabolon kaj induktas inflamon kaj inflamajn simptomojn, kiel ekzemple kartilago kaj subkondrala osta erozio, la kardinalaj simptomoj de OA.
18]. Torda respondo induktita kun acetacido estas vaste rigardita kiel la simulado de ekstercentra doloro en bestoj kie la inflama doloro povas esti kvante mezurita [1]
19]. La musa makrofaga ĉellinio, RAW264.7, estas populare uzata por studi la ĉelajn respondojn al inflamo. Sur aktivigo kun LPS, RAW264 makrofagoj aktivigas inflamajn vojojn kaj sekrecias plurajn inflamajn perantojn, kiel tiaj TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, kaj IL-6.
20]. Ĉi tiu studo taksis la kontraŭ-nociceptive kaj kontraŭinflamatoria efikoj de A. lappa kontraŭ OA en MIA besta modelo, acetacido-induktita besta modelo, kaj LPS-aktivigita RAW264.7 ĉeloj.
2. Materialoj kaj Metodoj
2.1. Planta Materialo
La sekigita radiko de A. lappa DC. uzata en la eksperimento estis akirita de Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seulo, Koreio). Ĝi estis identigita fare de Prof. Donghun Lee, Dept. de Herba farmakologio, Kol. de Korea Medicino, Gachon University, kaj la kuponnumero estis deponita kiel 18060301.
2.2. HPLC-Analizo de A. lappa Ekstrakto
A. lappa estis ĉerpita per reflua aparato (distilita akvo, 3 h je 100 °C). La ĉerpita solvaĵo estis filtrita kaj kondensita per malaltprema vaporigilo. A. lappa ekstrakto havis rendimenton de 44.69% post liofiliĝado sub −80 °C. Kromatografia analizo de A. lappa estis farita kun HPLC konektita uzante 1260 InfinityⅡ HPLC-sistemon (Agilent, Pal Alto, CA, Usono). Por kromata apartigo, EclipseXDB C18-kolumno (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) estis uzita je 35 °C. Entute 100 mg de la specimeno estis diluita en 10 mL da 50% metanolo kaj sonikita dum 10 min. Specimenoj estis filtritaj per injektilfiltrilo (Waters Corp., Milford, MA, Usono) de 0.45 μm. La movebla fazo-konsisto estis 0.1% fosfora acido (A) kaj acetonitrilo (B) kaj la kolumno estis eluita jene: 0-60 min, 0%; 60–65 min, 100%; 65–67 min, 100%; 67-72 min, 0% solvilo B kun flukvanto de 1.0 mL/min. La elfluo estis observita je 210 nm uzante injektan volumon de 10 μL. La analizo estis farita triope.
2.3. Besto-Loĝejo kaj Administrado
Masklaj Sprague-Dawley (SD) ratoj aĝaj 5 semajnoj kaj masklaj ICR-musoj aĝaj 6 semajnoj estis aĉetitaj de Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Koreio). Bestoj estis konservitaj en ĉambro uzante konstantan temperaturon (22 ± 2 °C) kaj humidon (55 ± 10%) kaj lumon/malhelan ciklon de 12/12 h. La bestoj estis familiarigitaj kun la kondiĉo dum pli ol semajno antaŭ ol la eksperimento komenciĝis. Bestoj havis laŭvole liveradon de furaĝo kaj akvo. La nunaj etikaj reguloj por prizorgado kaj pritraktado de bestoj ĉe Gachon University (GIACUC-R2019003) estis strikte sekvataj en ĉiuj bestaj eksperimentaj proceduroj. La studo estis desegnita enketisto-blindigita kaj paralela provo. Ni sekvis la eŭtanazio-metodon laŭ la gvidlinioj de la Besta Eksperimenta Etika Komitato.
2.4. MIA-Injekto kaj Traktado
Ratoj estis hazarde apartigitaj en 4 grupojn, nome falsaĵo, kontrolo, indometacin, kaj A. lappa. Estante anestezita kun 2% izofluorana O2-miksaĵo, la ratoj estis injektitaj uzante 50 μL da MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, Usono) intra-artike en la genuajn artikojn por konduki al eksperimenta OA. La traktadoj estis faritaj kiel sube: kontrolo kaj ŝajngrupoj estis konservitaj nur kun AIN-93G baza dieto. Nur, indometacin-grupo estis provizita per indometacino (3 mg/kg) korpigita en AIN-93G-dieto kaj A. lappa 300 mg/kg-grupo estis asignita al AIN-93G-dieto kompletigita kun A. lappa (300 mg/kg). La traktadoj daŭris dum 24 tagoj ekde la tago de indukto de OA kun rapideco de 15-17 g po 190-210 g korpa pezo ĉiutage.
2.5. Mezurado de Pezo
Post indukto de OA, mezurado de pezoporta kapacito de malantaŭaj membroj de la ratoj estis farita kun la nekapacito-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, Usono) kiel planite. La pezdistribuo sur malantaŭaj membroj estis kalkulita: pezoporta kapacito (%)
